Мікроклональне розмноження видів роду Gentiana L. флори України

Abstract

Підібрано умови для мікроклонального розмноження семи видів роду Тирлич (Gentiana L.) флори України: G. acaulis L., G. аsсlepiadea L., G. cruciata L., G. lutea L., G. pneumonanthe L., G. punctata L., G. verna L. Встановлено, що оптимальним для мультиплікації тирличів є середовище МС/2, доповнене різними співвідношеннями цитокінінів БАП (0,05–0,5 мг/л) та Кін (0,1–0,2 мг/л). Для кожного виду та його представників з різних місць зростання виявлено оптимальне для ефективного мікроклонування співвідношення фітогормонів. Відсоток живців з мікроклонами для більшості видів cкладав 70–90 %. Кількість утворених адвентивних пагонів на одному живці лежала в межах 2,62–7,35 та була найбільшою у випадку G. verna і найменшою – у G. acaulis і G. punctata.

Подобраны условия для микроклонального размножения семи видов рода Горечавка (Gentiana L.) флоры Украины: G. acaulis L., G. аsсlepiadea L., G. cruciata L., G. lutea L., G. pneumonanthe L., G. punctata L., G. verna L. Выяснено, что оптимальной для мультипликации горечавок является среда МС/2, дополненная различными соотношениями цитокининов БАП (0,05–0,5 мг/л) и Кин (0,1–0,2 мг/л). Для каждого вида и его представителей из разных мест произрастания установлено оптимальное для эффективного микроклонирования соотношение фитогормонов. Процент черенков с микроклонами для большинства видов составлял 70–90%. Количество образованных адвентивных побегов на одном черенке колебалось в пределах 2,62–7,35 и было наибольшим в случае G. verna и наименьшим – для G. acaulis и G. punctata.

Conditions for microclonal propagation of seven Gentiana L. species in Ukrainian flora were specified. Some peculiarities for generation of viable adventitious shoots in these species were detailed. In particular, optimal for reproduction of various Gentiana L. species was MS medium supplemented with half macro and microsalts (MS/2). In addition, for both Gentiana verna L. and Gentiana punctata L. plants the process of microclone formation was found to occur better in fluid MS/2 medium while plants of Gentiana acaulis L., Gentiana asclepiadea L., Gentiana cruciata L., Gentiana pneumonanthe L. та Gentiana punctata L species favoured agarized one. Plants from individual G. lutea (Rivna mountain valley) and G. acaulis (Turkul mountain) populatons for more effective formation of adventitious shoots needed increased amounts of СаCl2. Simultaneously, the efficiency of gentian micropropagation varies with density ratio of 6-benzilaminopurine and kinetin in medium wich in turn is determined by requirements of particular species and original genotype. Optimal for effective microcloning of G. lutea, G. acaulis, G. cruciata plants from various locations of vegetation were distinct phytohormone ratios in nutrient medium. At the same time, population beloning of G. asclepiadea, G. pneumonanthe and G. punctata failed to affect medium composition optimal for plant reproduction. Number of generated adventitious buds on inividual graft in case of G. verna as compared with other studied species was the highest, 7,48. Comparable with G. verna were indices of microcloning for G. cruciata (Village of Krenychi), 7,35, G. lutea (Pozhyzhevska mountain) and G. pneumonanthe (Koriukivka forestry), 6,32. Somewhat lesser were these indices for plants from other populations and for G. asclepiadea, whereas for G. acaulis and G. punctata imdices of microcloning efficiency were the least. The proportion of grafts with microclones for most species ranged within the limits from 70 to 90 %. The proposed technique of microclonal propagation of Gentiana species plants allows reproducing plants of rare pharmacologically valuable species with their simultaneous sanitation from pathogenic microflora: to forecast obtaining from single plant per year up to between 20 and 100 thousand identical plants.