Скринінг продуцентів тирозинази та тирозинфенолліази серед штамів Pantoea agglomerans

Abstract

Визначено активні продуценти тирозинази: P. agglomerans 9630а, Б80 і 7245. Встановлено, що всі штами P. agglomerans, які синтезують тирозиназу, є вірулентними. Авірулентні штами P. agglomerans тирозиназну активність не проявляють. Виявлено продуценти тирозинфенолліази (ТФЛ): Р. agglomerans 9630а, 7245, 123а, 9668. ТФЛ-активність проявляється лише при додаванні до поживного середовища вітаміну В6. Використання ТФЛ- активних штамів P. agglomerans 123а та 9668, що не мають тирозиназної активності, дозволяє вирішити питання усунення дифенольної активності і додавання стабілізуючих агентів до синтетичної реакційної суміші при отриманні L-Дофа.

Отобраны активные продуценты тирозиназы: Pantoea agglomerans 9630а, Б80 и 7245. Установлено, что все штаммы P. agglomerans, которые синтезируют тирозиназу, являются вирулентными. Авирулентные штаммы P. agglomerans тирозиназную активность не проявляют. Выявлены продуценты тирозинфеноллиазы (ТФЛ): P. agglomerans 9630а, 7245, 123а, 9668. ТФЛ-активность проявляется только при добавлении в питательную среду витамина В6. Использование ТФЛ-активных штаммов P. agglomerans 123а и 9668, что не имеют тирозиназної активности, позволяет решить вопрос устранения дифенольної активности и добавление стабилизирующих агентов к синтетической реакционной смеси при получении L-Дофа.

Biosynthesis of L-DOPA, the primary drug for treatment of Parkinson's disease can be realized by using one of two enzymes: tyrosinase (EC 1.14.18.1.) or tirozinfenolliaze (EC 4.1.99.2). The task of this work was to search for the producers of these enzymes among bacteria the species Pantoea agglomerans. Screening of producers was carried out among 45 virulent and avirulent strains of Pantoea agglomerans, which have been identified in various regions of Ukraine from wheat and rye. They were selected active producers of tyrosinase: Pantoea agglomerans 9630a, B80 and 7245. It is established that all strains of P. agglomerans that synthesize tyrosinase, are virulent. Avirulent strains of P. agglomerans tyrosinase activity do not show. Since the enzyme tyrosinase is also diphenol activity, biosynthesis of L-DOPA with tyrosinase producers require additional stabilization process. They were identified active producers of tirozinfenolliaze (TFL): P. agglomerans 9630a, 7245, 123A, 9668. Among them, two strains P. agglomerans 123a and P. agglomerans 9668 have only tirozinfenolliaze activity and have no tyrosinase activity. It is shown that the TFL-activity occurs only when added to the culture medium of vitamin B6. The use of TFL-active strains of P. agglomerans 123a and P. agglomerans 9668 that do not have tyrosinase activity, allows to solve the problem of eliminating diphenolic activity and addition of stabilizing agents to the synthetic reaction mixture in obtaining L-DOPA.